Особенности аммонийного разобщения фотосинтетических реакций в тилакоидных мембранах хлоропластов

• Автор: Васюхина, Лилия Александровна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 120 с. : ил.

Оглавление
Список сокращений
1. Введение
2. Обзор литературных данных
2.1. Действие аммония на процессы трансформации энергии в тилакоидах
2.1.1. «Классическое» разобщение электронного транспорта и синтеза АТФ
2.1.2. Стимуляция синтеза АТФ аммонием и другими гидрофильными аминами
2.2. Транспортные системы и транспортёры на тилакоидной мембране хлоропластов и аммонийные трансортёры
2.2.1. ТГ - канал в СБ0 АТФ-синтазы
2.2.2. К+ каналы/транспортёры
2.2.3. Транспортные системы, переносящие белки
2.2.4. Аммонийные танспортёры?
2.3. Возможность симпорта аммония с анионами слабых кислот
2.3.1. Разобщающее действие СЖК в хлоропластах и митохондриях
2.3.2. Разобщающее действие СССР
2.3.3. Разобщение с участием нейтральных пар, образованных липофильными анионами и катионами
3. Объект и методы исследования
3.1. Выделение тилакоидной системы хлоропластов из листьев гороха
3.2. Исследование функций тилакоидной системы
3.2.1. Определение скорости фотофосфорилирования
3.2.2. Измерение реакций базального транспорта электронов

3.2.3. Измерение величины светоиндуцированного поглощения протонов
3.3. Исследование распределения флуоресценции сульфородамина Б
в хлоропластах с помощью конфокальной микроскопии
3.4. Приготовление препаратов из хлоропластов Ререгот1а сарегМа для конфокальной микроскопии
4. Результаты
4.1. Исследование действия аммония в сопоставлении с действием других аминов
4.1.1. Два вида аммгнийного разобщения
4.1.2. Разобщение энергетики хлоропластов гидрофильными аминами
4.1.3. Разобщение липофильными аминами
4.2. Влияние СЖК и СССР на разобщение аминами
4.2.1. Синергизм действия аммония и пальмитиновой кислоты
4.2.2. Влияние СЖК с разной длиной углеводородной
цепи на разобщение аммонием
4.2.3. Пальмитиновая кислота стимулирует разобщение, индуцируемое имидазолом и метиламином
4.2.4. Синергизм действия липофильных аминов и СССР и его отличие от синергизма гидрофильных аминов и пальмитат
4.2.5. Особенности разобщения пальмитиновой кислотой
при pH 6
5. Заключение
6. Выводы
7. Список литературы

Список сокращений
ДрН - трансмембранный градиент pH
ДН - светоиндуцируемое поглощение ионов водорода
Н1" - ионы водорода
СЖК - свободные жирные кислоты
ПК - пальмитиновая кислота
АДФ - аденозиндифосфат
АТФ - аденозинтрифосфат
ГДФ - гуанозиндифосфат
ГТФ - гуанозинтрифосфат
MB - метилвиологен
ФМС - феназинметосульфат
СССР - карбонилцианид-м-хлорфенилгидразон
FCCP - карбонилцианид-р-трифлуорометоксифенилгидразон
SF6848 - 2,5-ди-?егг-бутил-4-гидроксибензилидин малонитрил
ТРР+ - тетрафенилфосфоний
ТРВ -тетрафенилборат
ANS — 1-анилино-8-нафталенсульфонат
ФС1 - фотосистема
ФСП - фотосистема
Хл - хлорофилл
ЭТЦ - электрон-транспортная цепь БСА - бычий сывороточный альбумин

зобщителвм фотосинтетического и окислительного фосфорилирова-ния.
Замещение Н1 в молекуле разобщителя метальной группой приводит к полной потере ADRY- (Renger and Inoue, 1983) и протонофорной (Terada, 1981) активности СССР.
При увеличении концентрации СССР выше 10 мкМ наблюдается подавление переноса электронов в реакции Хилла на изолированных хлоропластах (De Kiewiet et al., 1965; Katon and San Pietro, 1967; Барский и др. 1991). Ингибирование переноса электронов сопровождается тушением светоиндуцированных изменений выхода флуоресценции хлорофилла в ФСП (Itoh et al., 1969; Homann, 1971), отражающей окислительно-восстановительное состояние Qa. Ни один из известных доноров электрона для ФСП (MnCl2, NH2OH, Н202) не способен восстановить транспорт электронов (Keton and San Pietro, 1967) или повысить выход флуоресценции хлорофилла (Homann, 1971), подавленные СССР. Описанные эффекты не сопровождаются высвобождением атомов Mn (Kimimura et al., 1971).
2.3.3. Разобщение с участием нейтральных пар, образованных липофильными анионами и катионами
Разобщение с участием нейтральных ионных пар освещались во многих работах (Bakeeva et al., 1970; Foster and McLaughlin, 1974; Block et al., 1974; Kessler et al., 1977; Yamaguchi and Anraku, 1978; Terada, 1981; Garlid and Nakashima, 1983; Dedadie et al., 1987; Krishna-murthy, 1988; Terada et al., 1990; Ahmed and Krishnamurthy, 1990; Bar-stad et al., 1993; Kolajova et al., 1993; Orlov et al., 1994; Jaburek et al., 2001; Severin et al., 2010).
В разных лабораториях было показано, что такие протонофоры, как СССР, FCCP и SF6847, способны образовывать стабильные ком-